细胞培养需要哪些仪器耗材

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细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。

 

 

细胞培养需要哪些仪器和耗材支撑呢?

 

1.细胞培养,按产品主要可以分为:实验耗材和设备

 

2.细胞培养,按消耗品可以分为:血清、培养基和试剂,其中培养基包括无血清培养基、经典培养基和盐、干细胞培养基、特殊培养基、化学成分确定的培养基和其他培养基。

血清包括:胎牛血清 (FBS)、成年牛血清 (ABS) 和其他动物血清。

生物试剂主要包括:生长因子、补充剂、缓冲液、细胞解离试剂、平衡盐溶液、附着和基质因子、抗生素、抗真菌剂、检测试剂盒、冷冻保护剂和其他相关试剂。

 

其他细胞培养耗材主要包括:滚瓶、摇瓶、培养瓶、培养板、培养皿等

 

4.细胞培养相关的配套设备主要有:过滤系统、细胞计数器、二氧化碳培养箱、离心机、高压灭菌器、显微镜、生物安全柜和其他配套设备,如移液器、移液器、细胞插入物、细胞刮刀、细胞升降器、细胞散布器、pH 计、振荡器、流式细胞仪、水浴锅、生物反应器、传统生物反应器、一次性生物反应器、微载体生物反应器、低温冰箱、超低温冰箱、低温冷藏箱、低温存储箱、液氮罐等。

 

细胞培养的主要应用领域包括:生物制药、单克隆抗体、抗体生产、蛋白质开发、分子诊断、药物筛选、新药研发、组织工程、细胞工程、基因工程等。

 

于很多生物研究者来说,培养细胞重要的一点是,在培养的过程中一定要注意细胞的污染,一般来说,细胞污染不可避免,但可以减少其发生的频率和后果的严重性,所以在培养细胞的过程中一定要注意细胞培养的环境监测、清洁和消杀。

 

细胞培养生产过程中如何预防细胞污染呢

一)细胞房环境控制

环境要求:

洁净区10000级,局部100级,定期进行沉降菌检测

环境消毒:每周一次定期消毒灭菌

1) 地面/墙面:诺福消毒液、84消毒液交叉使用

2) 环境消毒:定期紫外照射,臭氧熏蒸,定期过氧化氢灭菌

3) 仪器设备表面:75%酒精擦拭

 

二)实验人员管理

着装:

着连体衣,戴口罩、手套,头发、手腕等要包好,减少皮肤外露。

行为:

减少走动,出入关门,操作时不要讲话。

技能:

养成良好的无菌操作习惯。

其他:

减少共用物品,公共使用区域统一使用习惯,区分洁净区域和有风险的区域。

 

三)实验用品管理

试剂:

使用前确保无菌,自己配制的试剂需过滤除菌后再使用。

耗材:

需要重复使用的耗材确保按照规定清洗、高温高压灭菌,使用灭菌指示带。灭菌后烘干的耗材立刻放进超净台,一周内使用完毕,未使用完的,需重新灭菌再使用。

仪器设备:

定期使用诺福消毒剂擦拭消毒,培养箱、显微镜托盘等高风险区域需经常清洁,培养箱水盘和复苏用的水浴锅需添加诺福杀菌剂。

 

其他:

当出现培养物泄漏时,应及时清理干净;出现局部污染时,应找出污染源并对环境整体消毒。

 

细胞房环境整体消毒哪种方式好?

气溶胶电动喷雾,这种要人工现场操作,费时费力,还要忍受现场消毒剂的刺激气味,对人员伤害不少,如果操作不当还有可能损坏腐蚀其他仪器设备。

甲醛熏蒸,此方式的作用效果强,但毒性大,一级致癌物质,对人体伤害的严重性难以评估,还会有残留物,花费很多人力清除残留。现在很少使用这种落后的消杀方式。

紫外灯消毒,紫外灯算不上是整体消毒,只能是局部的有限范围的消毒,单单依靠紫外线是很有限的,还要结合其它的消杀方式一起使用。

臭氧熏蒸,臭氧一般是作为日期消毒,监测浓度来说明效果也只是做个样子而已,其实并不能达到灭菌级别,臭氧很不稳定,难以在各个部位维持足够时间的浓度,而且臭氧有很大的氧化性,对橡胶、地坪、彩钢板和精密仪器都有损害。

过氧化氢灭菌,细胞房过氧化氢空间灭菌是比较流行的消杀方式,系现在的主流,但过氧化氢厂家品牌繁多,质量水平参差不齐,说白了就是不专业又想摊上一块蛋糕,后面苦的是自己和细胞培养单位。

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