分析细胞培养生物污染的常见类型 解决上海杭州实验室真菌污染 提供上门消毒服务

细胞培养污染物主要分为两大类:化学污染物和生物污染物。

一、化学污染物

化学污染物主要包括培养基、血清和水中的杂质,如内毒素、增塑剂和洗涤剂等。这些污染物可能对细胞生长和实验结果产生不利影响,因此需要在细胞培养过程中严格控制其浓度。

二、生物污染物

生物污染物是细胞培养中更为常见且影响更为严重的一类污染物,主要包括细菌、霉菌、酵母、病毒和支原体等,以及其他细胞系的交叉污染。

1. 细菌污染

细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物,直径通常仅为几微米,形态多样,包括球状、杆状和螺旋状等。由于其分布广泛、生长迅速和体积小等特点,细菌成为细胞培养中最常见的生物污染物之一。细菌污染后,培养物在几天内便会变得浑浊,有时表面会出现一层薄膜,且培养基的pH值会突然下降。在显微镜下观察,细菌以细小颗粒的形式存在于细胞之间,高倍镜下可分辨出单个细菌的形状。

细菌污染

2. 酵母污染

酵母属于真菌界中的单细胞真核微生物,大小通常为几微米,罕见情况下可达40 µm。酵母污染后,培养物同样会变得混浊,尤其在污染后期更为明显。与细菌污染不同的是,酵母污染过程中培养物的pH值变化较小,通常仅在污染严重时才会升高。显微镜下观察,酵母呈单个卵球形或球形颗粒,有时会出现芽生现象。

酵母菌污染

3. 霉菌污染

霉菌亦属于真菌界真核微生物,以多细胞丝状体形式生长,称为菌丝。这些菌丝构成的交联网络含有遗传性相同的细胞核,被称为集落或菌丝体。霉菌污染后,培养物初期pH值保持稳定,随着感染程度加剧,pH值迅速上升且培养物变浑浊。显微镜下可见菌丝体呈细长丝状,有时呈密集孢子团。

霉菌污染

 

4. 病毒污染

病毒是一种微小的感染性病原体,依赖宿主细胞结构进行繁殖。由于其体积极小,难以在培养中被检测,也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。病毒通常对宿主具有严格的选择性,因此一般不会对非宿主物种的细胞培养物产生影响。然而,被病毒感染的细胞培养物可能对实验室人员构成严重健康威胁。检测病毒感染的方法包括电子显微镜观察、免疫染色、ELISA检测以及PCR扩增等。

病毒污染

 

5. 支原体污染

支原体是一种无细胞壁的简单细菌,被认为是最小的自我复制生物。由于其体积非常小(通常小于1 µm),因此在达到极高密度导致细胞培养物变质之前,很难被检测到。慢性支原体感染可能导致细胞增殖率降低、饱和密度下降以及悬浮培养物凝集等现象。检测支原体污染的唯一可靠方法是定期采用荧光染色、ELISA、PCR、免疫染色、放射自显影或微生物测定法等进行检测。

 

支原体污染

 

细胞培养过程中的污染物控制至关重要,以确保实验结果的准确性和可靠性。

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